親族の嫌がらせは夫婦関係の破綻の原因になりますか?

私は離婚希望、妻は絶対拒否しています。私が離婚したい理由は性格の不一致で、すでに別居しています。
気がかりは、私の母が妻や妻の親に失礼な態度を取ったり、夫婦のことに過干渉だったりしたことです。
裁判で妻にそれを訴えられたら、不利ですか?

性格の不一致での離婚請求については、相手が合意をしてくれない限り認めてもらえないケースが多いでしょう。

こちらの親族と配偶者との間での性格の不一致に間しても同様で、親へのご相談者様の対応について婚姻を継続し難い重大な事由とならない場合には離婚理由とはなりにくいでしょう。

私は妻をかばっていたつもりですが、恥ずかしながら実母を止め切ることはできませんでした。
実母の嫌がやらせが有責事由になると、私に非はなくても、私からの離婚請求が認められないのか、不安でした。

一般的な回答となりますが、親族への対応が婚姻を継続し難い重大な事由となるケースはそう多くはないかと思われますので、こちらが有責配偶者となる可能性は低いケースが多いかと思われます。

>実母の嫌がやらせが有責事由になると、私に非はなくても、私からの離婚請求が認められないのか、不安でした。

実母の嫌がらせの内容・程度、それを貴方が黙認していたとして黙認の程度、婚姻関係への影響等との関係で、実母の嫌がらせが貴方自身の有責性と同視できるかどうかなどが問題になると考えられます。

具体的な事情を弁護士に説明するなどして、個別に相談なさった方がよいケースであるように思います。